隨著我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的迅猛發(fā)展，軍、警犬得到廣泛應(yīng)用同時(shí)，肉用犬的飼養(yǎng)已經(jīng)形成規(guī)模，寵物犬進(jìn)入百姓家庭，尤其是國(guó)內(nèi)外的名優(yōu)品種，如我國(guó)的藏獒、美國(guó)的哈士奇、可卡等等。為適應(yīng)我國(guó)軍、警犬及生物醫(yī)學(xué)和提高寵物犬品質(zhì)的發(fā)展需要，我們已經(jīng)采用犬的人工授精技術(shù)，這對(duì)我國(guó)犬業(yè)的發(fā)展有著重要的意義。
犬的人工授精是一種先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)，具有很多優(yōu)越性，可以提高種公犬的利用率，使優(yōu)良公犬能充分發(fā)揮高產(chǎn)的遺傳性，可以減少公犬的飼養(yǎng)數(shù)量及降低種公犬的飼養(yǎng)費(fèi)用，把人力、物力、財(cái)力放在優(yōu)良公犬的飼養(yǎng)上，以提高犬的品質(zhì)。選擇優(yōu)良的種公犬，進(jìn)行采精，然后將精液輸入子宮內(nèi)，可以提高受胎率及產(chǎn)仔率。我們通過幾年來的試驗(yàn)和推廣，使犬的人工授精技術(shù)得到推廣應(yīng)用，受胎率達(dá)85%左右，與自然交配相似，取得成功，現(xiàn)將我們的在生產(chǎn)實(shí)踐中成功做法總結(jié)如下，供廣大同行和養(yǎng)犬基地參考。
采精
1 公犬的調(diào)教
犬是經(jīng)過人類長(zhǎng)期的飼養(yǎng)馴化來的，生理特點(diǎn)和公犬的品種性格的不同以及因個(gè)體不同，調(diào)教的效果也很不一致。有的公犬性欲較強(qiáng)，性格溫順，能很快適應(yīng)人工采精，而有部分公犬膽怯、性欲差，則需較長(zhǎng)時(shí)間耐心地調(diào)教。在調(diào)教過程中，要有耐心，切勿粗暴地對(duì)待，否則種公犬形成恐懼心理，更加劇了調(diào)教的困難，甚至造成人、犬的傷害。開始調(diào)教時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)情旺盛、性情溫馴、與公犬體格相適應(yīng)的發(fā)情母犬作為“臺(tái)犬”。待公犬爬上臺(tái)犬后，操作人員按摩其睪丸及陰莖，使陰莖勃起，這樣經(jīng)數(shù)次調(diào)教即能適應(yīng)人工采精操作。待種公犬習(xí)慣于人工采精，并建立了條件反射后，不再以母犬作臺(tái)犬?？芍苯舆M(jìn)行采精。
2 場(chǎng)地的準(zhǔn)備
為了保證公犬有一個(gè)良好的性欲反射條件，必須選好采精的場(chǎng)地。采精場(chǎng)應(yīng)寬敞、安靜、清潔，并要徹底消毒，最好是公犬熟悉的環(huán)境，減少公犬的恐懼心理。
3 臺(tái)犬的準(zhǔn)備
目前我們多采用發(fā)情的母犬作為臺(tái)犬。發(fā)情母犬的氣味可以提高公犬的性欲，刺激公犬的射精。采精前臺(tái)犬的后軀、尾根部、外陰部、肛門部位，都應(yīng)徹底洗滌清潔，再用消毒過的干抹布擦干。
4 采精
4.1 采精方法
通常有兩種方法即手握法和假陰道采精法。我們多采用前者，操作人員手戴—上乳膠手套，輕緩地抓住公犬陰莖輕緩地拉出包皮，握住陰莖球給予適當(dāng)?shù)膲毫?，公犬的陰莖便會(huì)充分勃起。經(jīng)按摩1min左右即可射精。由于公犬為分段射精，在射精間隙更換集精容器，分段收集精液。犬的射精量為2ml～15ml，分作三部分排出。第一部分是由尿道球腺分泌的水樣粘液，無精子；第二部分來自睪丸，富含有精子，呈白色粘滑液體；最后部分是前列腺分泌物，容量較多，含有少量精子。在第二段射精后，公犬表現(xiàn)為抬起一只后腿企圖越過采精者的手臂，在自然交配過程中也會(huì)發(fā)生抬后腿現(xiàn)象，越過母犬背部將身體轉(zhuǎn)向相反方向。因此，用于人工授精的精液最好為第二段排出的精液。在收集精液時(shí)，要特別注意器具不能觸及龜頭，否則會(huì)造成射精停止。另外，采精手應(yīng)在龜頭的背部必須保持一定的壓力。采到的精液要立即用等溫的稀釋液1∶1 稀釋，并馬上鏡檢，根據(jù)鮮精的活力和密度決定稀釋倍數(shù)。
4.2 采精頻度
采精頻度對(duì)于公犬的性欲、采精量及精液品質(zhì)均有較大的影響。如果在24h內(nèi)采精3次，精子濃度即會(huì)降低、精子存活時(shí)間明顯縮短。連續(xù)5天每日采精2次，畸形精子數(shù)會(huì)大大增加。因此公犬適宜的采精頻度應(yīng)該是1周采精2～3次。
精液的品質(zhì)檢查
1 精液量
大型品種的犬，射精量可30ml以上，而小型品種射精量?jī)H有幾毫升。 種公犬的射精量，因其個(gè)體、年齡、采精方法、采精頻率和營(yíng)養(yǎng)狀況等多種因素影響。射精量太多，可能是由于過多的副性腺泌物或其他異物混入，若過少可能是由于采精方法不當(dāng)或生殖官功能衰退所致。發(fā)現(xiàn)這種情況就應(yīng)該改進(jìn)采精技術(shù)和方法，改進(jìn)種公犬飼養(yǎng)管理或調(diào)整采精頻率。由于我們?cè)谂R床一線工作，因此所接觸的犬出現(xiàn)這些問題，都是在人工授精前期，首先對(duì)種公犬進(jìn)行調(diào)教采精，進(jìn)行精液品質(zhì)的檢查，給與技術(shù)指導(dǎo)，將受精過程可能出現(xiàn)的問題，盡量在進(jìn)行人工授精前解決。
2 精液色澤
正常犬精液呈灰白色，其色澤深淺取決于精液中混合的白細(xì)胞及其他細(xì)胞的含量。若精液呈淡綠色是混有濃液，呈淡紅色是其中混有血液，呈黃色是混有尿液，凡屬上述顏色的異常精液，應(yīng)該丟棄或停止采精，并找到病因，對(duì)相應(yīng)的疾病進(jìn)行治療。
3 精子活率
是指精液中有直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子百分率，是評(píng)定精液品質(zhì)優(yōu)劣的重要指標(biāo)之一，也稱精子活力。檢查方法是在載玻片上放1滴精液，用蓋玻片壓上，制成壓片置于400倍的顯微鏡下觀察。精子活率一般采用10級(jí)評(píng)分，即按精子直線前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的百分比評(píng)為10個(gè)等級(jí)： 100％前進(jìn)者為1.0分，90%前進(jìn)的為0.9分，以下類推。
4 精子密度
是指精液的單位容積（1ml）內(nèi)所含精子數(shù)目，是評(píng)定精液品質(zhì)的一項(xiàng)重要指標(biāo)，也稱精子濃度。我們多采用血細(xì)胞計(jì)算器計(jì)算法。
用血細(xì)胞計(jì)算器，在顯微鏡下計(jì)數(shù)，即將精液稀釋成200倍時(shí)，則用血紅細(xì)胞吸管稀釋。稀釋液用 3％的氯化鈉溶液，以殺死精子便于計(jì)算，其計(jì)數(shù)方法與血細(xì)胞計(jì)數(shù)相同。
5 精子的畸形率
是指形狀不正常的精子。精液中的畸形精子的比率越高，受孕率就越低。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，犬精子畸形率不得超過10%～15%?；尉臃N類很多，如頭部巨大、瘦小、細(xì)長(zhǎng)、圓形、皺縮、缺損、雙頭等，頸部膨大、雙體、纖細(xì)、屈折等，回旋、短小、長(zhǎng)大、雙尾等。
6 pH 值的側(cè)定
測(cè)定的方法是用萬能試紙比色來測(cè)定，犬的精液ph值平均為6.4（6.1～7.0），pH值的高低與副性腺分泌物有關(guān)，第一部分精液pH 值居中、第二部分精液的 pH值最低；第三部分精液的 pH值最高。pH值偏低的品質(zhì)較好，pH值偏高的精子活力、受精力都顯著降低。
精液的稀釋
精液稀釋的目的在于增加精液的容量，擴(kuò)大配種頭數(shù)。在實(shí)際操作中參考同仁的方法常用稀釋液有以下三種：
1 奶粉稀釋液
奶粉 10～12g，放在三角燒杯內(nèi)，然后加入蒸餾水100ml，攪拌均勻后過濾，進(jìn)行蒸煮消毒。
2 奶粉、卵黃稀釋液
取奶粉10g先用少量水調(diào)成糊狀，再加蒸餾水至100ml用紗布過濾，在水浴中加溫至95℃，待冷卻后加入卵黃10ml，青霉素10萬IU，鏈霉素10萬IU。
3 檸檬酸鈉稀釋液
檸檬酸鈉(含1分子水)11.85g，葡萄糖4g，純化水400ml，使用時(shí)加20%卵黃。
稀釋倍數(shù)，一般根據(jù)原精液的密度來決定，通常犬精液可稀釋l～3 倍。
輸精
1 母犬的準(zhǔn)備
將發(fā)情母犬保定后，尾巴拉向一邊，將陰門及附近用溫肥皂水擦洗干凈，并用消毒液進(jìn)行消毒，而后再用生理鹽水沖洗，之后擦干凈。
2 確定最佳配種時(shí)間
若能在母犬的排卵時(shí)間予以配種的話，則能收到最佳的妊娠效果。但遺憾的是到現(xiàn)在為止在臨床實(shí)踐中尚未找到一種非?？煽康拇_定母犬排卵時(shí)間的方法。不過用幾種方法進(jìn)行綜合判定常能取得較好的效果。我們通過觀察母犬陰道黏膜的顏色的變化和陰道細(xì)胞學(xué)檢查法，間接確定母犬排卵時(shí)間。
2.1 母犬陰道黏膜的顏色的變化
雌激素的增多是以下變化的主要原因。如陰道黏膜的水腫、增生及角質(zhì)化等。在間情期陰道黏膜上皮只有2～3層，故黏膜上血管明顯，呈玫瑰紅。而在發(fā)情期，由于雌激素的作用，陰道黏膜上皮達(dá)到15～20層，故陰道黏膜顏色變白及形成特有的浮冰樣堆積。用徹底消毒的開膣器進(jìn)行陰道內(nèi)檢查，起初開膣器的方向朝上，然后水平向前推。達(dá)到一定深度后，在專用光源的幫助下，觀察陰道黏膜顏色及分泌物等。如陰道黏膜顏色蒼白，黏膜腫脹程度適中，用手觸及外陰根部，變軟而不是腫脹的較硬，分泌物增多者多為進(jìn)入排卵期。
2.2 陰道細(xì)胞學(xué)檢查
陰道細(xì)胞學(xué)檢查可在做陰道檢查的同時(shí)用無菌的棉拭子在陰道深處輕輕擦拭一下以采得陰道黏膜上皮(陰道前庭處的陰道黏膜上皮受雌激素的影響不大，故要在陰道深處采樣)，然后在載玻片上輕輕的滾一下。用帕帕尼科方法，亦可用姬姆薩方法染色、陰道細(xì)胞染色的判定標(biāo)準(zhǔn)主要是根據(jù)細(xì)胞的大小、形狀、細(xì)胞核與細(xì)胞漿成分的比例及核內(nèi)物質(zhì)的存在與否。
在發(fā)情前期向發(fā)情過渡時(shí)，淺層細(xì)胞增多，且逐漸的角質(zhì)化。在接近排卵時(shí)看到的幾乎都是角質(zhì)化的表層細(xì)胞(80％～90％)，這些細(xì)胞單個(gè)的平位于載玻片上，猶如碎玻璃片。實(shí)踐證明，大約75～80％的母犬在最大角質(zhì)化程度后的第1天發(fā)生排卵。
3 輸精管的準(zhǔn)備
犬的輸精管可用尼龍軟管、玻璃細(xì)管等自制的輸精管，使用前高壓滅菌徹底消毒，防止人為造成細(xì)菌感染。
4 精液的準(zhǔn)備
由于凍精在母犬生殖道內(nèi)的存活時(shí)間縮短，活力較弱，受胎率較低，因此，我們采取的新鮮精液，在水浴鍋中保持35℃左右，用顯微鏡鏡進(jìn)行品質(zhì)檢查后用稀釋液后稀釋，然后進(jìn)行輸精。
5 輸精方法
母犬的陰道向后下方傾，與脊柱呈45°，在人工輸精時(shí)要注意這一生理特點(diǎn)。 將母犬站立保定，使輸精管沿著背線方向緩慢地旋轉(zhuǎn)插入陰道7～10cm深，于子宮頸口的位置，慢慢注入精液，輸完精后，母犬的后軀抬高片刻，而且用右手按摩幾分鐘陰道口外部，刺激母犬子宮收縮，便于子宮內(nèi)精子的運(yùn)行，以防止精液流出。隔日進(jìn)行第2次輸精。犬的一次輸精量為3～5 ml ，內(nèi)含有效精子數(shù)1億左右。
討論與小結(jié)
1 具有很高的經(jīng)濟(jì)效益
犬人工輸精節(jié)省種公犬，降低飼養(yǎng)成本。經(jīng)試驗(yàn)用本交配種，公母比例為1∶5，用人工輸精公母比例為1∶80～100，可提高16倍。而我們?cè)陂T診，接觸的大部分為寵物犬，且多為家里只有一條母犬，缺乏優(yōu)良的種公犬。因此，更加提高了種公犬的利用率，在今后的發(fā)展應(yīng)該向凍精授精發(fā)展，但目前首要解決的就是提高凍精授精的受胎率技術(shù)。
2 提高人工授精的受胎率，種公犬飼養(yǎng)管理?xiàng)l件要求較高，必須喂給全價(jià)飼料，做好疾病的預(yù)防和良好的衛(wèi)生條件，才能保證種公犬健康和取得良好的精液品質(zhì)。
3 在犬的自然交配過程中，犬的陰莖海綿體充塞陰道，公犬陰莖根部的球狀海綿體膨大，使公母犬尾對(duì)尾地“鎖結(jié)”在一起。每次交配一般持續(xù)10～20分鐘，使射出精液流向子宮頸進(jìn)入子宮，避免精液倒流。在人工授精中我們提高后軀，用手堵住陰道口外部，按摩幾分鐘，就是起到使精子充分的進(jìn)入子宮角的作用。
4 在人工輸精過程中，應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程做好采精、精液品質(zhì)的檢查、精液的稀釋和輸精每個(gè)環(huán)節(jié)，才能獲得較好的效果，提高受胎率。